Contents 7
Chapter 7
Contrasting Techniques. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
Brightfield. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 45
Darkfield. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
Phase Contrast. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
Oblique Illumination. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 46
Improved Hoffman Modulation Contrast (iHMC). . . . . . . . . . . . 47
Differential Interference Contrast (DIC). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47
Polarization Contrast. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47
Fluorescence . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 48
PART III
SAMPLE PREPARATION IN LIGHT MICROSCOPY. . 49
Chapter 8
Sample Preparation Techniques and Equipment. . 51
Requirements for Transmitted Light Brightfield
Microscopy. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 51
Dry Mounts. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 52
Wet Mount. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 52
Smear Slides. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 52
Squash Slides. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54
Stained Tissue Section . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54
Pre-Prepared Slides. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 54
Chapter 9
Sample Preparation of Histological Tissue. . . . . . . . . 55
Fix Histological Samples to Keep Them Fit for Purpose. . . . . . . 55
Cut Slices Thin Like Parma Ham . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 56
Bringing More Color into Life. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 56
Chapter 10
Important Staining Techniques. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 57
Hematoxylin and Eosin: The Major Stain in Histology. . . . . . . . 57
If H&E Is Not Enough. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 57
Papanicolaou Staining. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 58
Giemsa and Wright Staining to Reveal Blood Components . . . 58
Gram Stain for Bacteria . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 58